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Graf Wilhelm der Reiche von Nassau setzt mit Hilfe des Reformators Erasmus Sarcerius die Einführung der evangelisch-lutherischen Gottesdienstordnung durch. Bald danach wird in Keppel eine Schule eingerichtet und Schülerinnen aus adligem und z.T. auch aus bürgerlichem Haus werden aufgenommen. So setzte Wilhelm I., Graf von Nassau-Dillenburg, der sich seit 1530 immer entschiedener der Reformation zuwandte, die Nürnbergische Ordnung gegen die prämonstratensische Regel. Laut Anordnung vom 21. Juni 1538 sollten Messe und Chorgebet in Keppel in deutscher Sprache gehalten werden. Bis zum Jahre 1547, festgeschrieben durch die vom Landesherrn erlassene ?Ordenung zu Keppel?, hatte sich das ehemalige Kloster in ein freiweltliches Stift evangelischer Prägung gewandelt.

Während im Mittelalter klösterliche Kontemplation das Leben der Prämonstratenserinnen in Keppel bestimmte, wurden im Zuge der Reformation die nunmehr "freiweltlichen" Stiftsfräulein zur Ableistung ihrer Präbende in die Pflicht genommen, "junge frawen und schullmägdelein" zu unterrichten. Einem alten Lehrplan zufolge sollten sie ihnen "neben lesen schreiben und rechnen auch spinnen, nähen, sticken und wirken" beibringen, des weiteren "distilliren und waßer brennen, kochen zu disch, im hause, stuben und kammern uffzuraumen und sauber zu halten, damit sie hernach deste eher und beßer zu gutten heyrathen kommen, sich mit got und ehren ernehren".

Endgültig und unwiederbringlich erfolgte die Umwandlung 1594 durch eine neuerliche erlassene Ordnung durch den Sohn Graf Wilhelms von Nassau, Johann VI., in der die Bezeichnung Kloster gänzlich vermieden wurde. Das seit der Reformation "freiweltliche" Fräuleinstift hatte sich mittlerweile profanen Aufgaben zugewandt. Noch in dem alten, überkommenen Klostergemäuer war unter Graf Wilhelm von Nassau Mitte des 16. Jahrhunderts für "junge Mädergen und Junfferen" eine Schule eingerichtet worden. Sie erlangte über die Grenzen Nassaus hinaus hohes Ansehen und florierte bis zu Beginn des Dreißigjährigen Krieges.

Hier kam es zum Herrschaftswechsel "vom Krummstab" zum "Nassauischen Löwen". Sehr behutsam erließ Graf Wilhelm der Reiche eine neue, nunmehr evangelische "Klosterordnung", die ohne große Widerstände - nur zwei Klosterfrauen nahmen die ihnen freigestellte Trennung vom Stift wahr - angenommen wurde. Erst unter seinem streng kalvinistischen Sohn Johann dem Älteren wurde Keppel zu einem "freiweltlichen Damenstift" säkularisiert, d. h. in seiner 1594 aufgelegten Ordnung ist die Bezeichnung "Kloster" endgültig getilgt. Keineswegs wurde aber der Siftsbesitz zur landesherrlichen Eigenverwendung eingezogen, also eine Gütersäkularisation war es nicht. Die Stiftungsmittel dienten weiterhin dem standesgemäßen Unterhalt unverheirateter Adelstöchter, ganz im Sinne der stiftsinteressierten Ritterschaft, aus deren Kreis Anfang des 13. Jahrhunderts die Ritter vom Hain das Kloster Keppel gestiftet hatten